គោលការណ៍ជាមូលដ្ឋាននៃការសំយោគ DNA

ការសំយោគ DNA គីមីគឺផ្អែកលើយុទ្ធសាស្ត្រសំយោគដំណាក់កាលរឹង និងគីមីសាស្ត្រ phosphoramidite ។ខុសពីការសំយោគ DNA ជីវសាស្រ្ត សម្ភារៈក្នុងការសំយោគ DNA គីមីគឺ DMT (4, 4-dimethoxytrityl) និង phosphoramidite កែប្រែ deoxyriboxyside ដូចបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 1។ ការសំយោគ DNA ត្រូវបានអនុវត្តលើការគាំទ្រដ៏រឹងមាំ (យើងអាចផ្តល់ជូនផ្សេងៗនៃជួរឈរសំយោគ Oligo) ពោលគឺ CPG (កញ្ចក់រន្ធញើសដែលគ្រប់គ្រង) និង PS (polystyrene) ហើយការសំយោគទាំងមូលត្រូវបានអនុវត្តនៅលើឧបករណ៍សំយោគ DNA/RNAដែលជាឧបករណ៍សំខាន់របស់យើង មានគំរូផ្សេងៗគ្នាដូចជា៖ HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 និងល ទិសដៅសំយោគគឺពី 3' ទៅ 5' ហើយនុយក្លេអូទីតត្រូវបានណែនាំដល់ការគាំទ្រដ៏រឹងមាំតាមរយៈមួយ វដ្តសំយោគ។វដ្តសំយោគជាធម្មតាមានបួនជំហានគឺ Deprotection, Coupling, Capping និង Oxidation (រូបភាពទី 2) ។Deprotection ត្រូវបានកំណត់ដើម្បីលុបក្រុម DMT នៅលើការគាំទ្ររឹង ឬក្រុម 5' hydroxyl នៅលើ nucleoside មុន, អាស៊ីត trichloroacetic 3% នៅក្នុង dichloromethane ត្រូវបានប្រើជាសារធាតុការពារ។បន្ទាប់មក deoxyriboxyside ដែលបានកែប្រែ phosphoramidite ត្រូវបានអនុញ្ញាតឱ្យបញ្ចេញក្រុម hydroxyl ដោយមានជំនួយពី activator ពោលគឺ 5-ethylthiotetrazole ឬ 4, 5-dicyanoimidazole បង្កើតជា phosphitetriester (III) ហើយបានដឹងពីជំហាននៃការភ្ជាប់គ្នា។ជំហាន Capping ត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីទប់ស្កាត់ក្រុម hydroxyl ដែលមិនមានប្រតិកម្មកំឡុងពេលភ្ជាប់ជំហាន ដើម្បីកាត់បន្ថយការកកើតនៃលំដាប់ពិការភាពដែលមិនចង់បាន។ទីបំផុត phosphitetriester ដែលមិនស្ថិតស្ថេរ (III) ត្រូវបានកត់សុីទៅជា phosphortriester (V) ដែលមានស្ថេរភាពគីមីជាមួយនឹងអ៊ីយ៉ូតជាអុកស៊ីតកម្មនៅក្នុងបច្ចុប្បន្ននៃ pyridine ។

DNA សំយោគអាចត្រូវបានបំបែកចេញពីការគាំទ្រដ៏រឹងមាំដោយ aminolysis ក្រុមការពារ 2-cyanoethyl នៅលើ phosphortriester និង amide នៅលើ nucleobase ត្រូវបានបំបែកក្នុងពេលតែមួយ ចានសំយោគ និងជួរឈរសំយោគនៅក្នុង racks ត្រូវបានដាក់ដោយផ្ទាល់នៅក្នុងបន្ទប់ប្រតិកម្ម។ នៃឧបករណ៍ការពារ.DNA ឆៅអាចត្រូវបានរៀបចំដោយ HPLC, electrophoresis និង OPC តាមតម្រូវការ យើងក៏អាចផ្តល់ជូនអ្នកផងដែរ។ឧបករណ៍បន្សុតសម្រាប់ដំណើរការក្រោយ។