ឧបករណ៍បន្សុតសម្រាប់ការបន្សុត Oligo

1. Gel Electrophoresis Chromatography បន្សុត
ប្រើ denaturing polyacrylamide gel electrophoresis chromatography សម្រាប់ការបន្សុត។ភ្នាក់ងារ denaturing ជាទូទៅគឺ 4M formamide ឬ 7M អ៊ុយ, កំហាប់នៃ acrylamide គឺរវាង 5-15%, និងសមាមាត្រនៃ methacrylamide ជាចម្បងរវាង 2-10% ។
បន្ទាប់ពី electrophoresis ទីតាំងនៃក្រុមអាស៊ីត nucleic ត្រូវតែត្រូវបានកំណត់នៅក្រោមការ irradiation នៃពន្លឺ ultraviolet, ជែលដែលមានអាស៊ីត nucleic គោលដៅត្រូវបានកាត់ផ្តាច់, អាស៊ីត nucleic ត្រូវបានបំបែកនិង leached ហើយបន្ទាប់មកដំណោះស្រាយ leaching ត្រូវបានប្រមូលផ្តុំ, desalted, បរិមាណនិង lyophilized ។

2. DMT-On, HPLC Purification
ជ្រើសរើសរបៀប DMT-On កំឡុងពេលសំយោគ ផលិតផលឆៅត្រូវបាន centrifuged និងប្រមូលផ្តុំនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដើម្បីយកអាម៉ូញាក់លើសចេញបន្ទាប់ពី aminolysis ។
ការបំបែកត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើជួរឈរ C18 ជាមួយ acetonitrile និង 10% អាស៊ីត triethylamine-acetic (TEAA) ជាវត្ថុសំខាន់។បន្ទាប់ពីការ elution ត្រូវបានបញ្ចប់វាត្រូវបានប្រមូលផ្តុំហើយបន្ទាប់មកក្រុម DMT ត្រូវបានយកចេញដោយអាស៊ីត trifluoroacetic ។បន្ទាប់ពីការធ្វើអព្យាក្រឹត អំបិល និងម៉ូលេគុលតូចៗមួយចំនួនត្រូវបានយកចេញតាមបំពង់កាត់ ហើយចុងក្រោយត្រូវបានរំលាយចោល។

វិធីសាស្រ្តនេះអាចទទួលបានផលិតផលដែលមានភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ជាងប៉ុន្តែវាចាំបាច់ក្នុងការយកចិត្តទុកដាក់ចំពោះការកើតឡើងនៃ depurination ។

3. DMT-Off, ការបន្សុត HPLC
ជ្រើសរើស DMT-Off កំឡុងពេលសំយោគ ហើយផលិតផលឆៅត្រូវបាន centrifuged និងប្រមូលផ្តុំនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដើម្បីដកអាម៉ូញាក់លើសបន្ទាប់ពី ammonolysis ។
ការបំបែកត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើជួរឈរ C18 ជាមួយ acetonitrile និង 10% នៃអាស៊ីត triethylamine-acetic នៅក្នុងទឹកជា eluent ។បន្ទាប់ពីការបំបែកត្រូវបានបញ្ចប់និងកំណត់បរិមាណ aliquots ត្រូវបាន lyophilized ។

វិធីសាស្រ្តនេះតម្រូវឱ្យមានការកែតម្រូវដោយប្រុងប្រយ័ត្ននូវលក្ខខណ្ឌនៃការបំបែក ហើយក៏អាចទទួលបានម៉ូលេគុលគោលដៅសុទ្ធផងដែរ។