ការសំយោគអាស៊ីត nucleic ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ sialic amide triglyceride ដំណាក់កាលរឹង ដែលចុងបញ្ចប់ 3′ នៃ DNA ត្រូវបាន immobilized នៅលើស្រទាប់ខាងក្រោមដំណាក់កាលរឹង ហើយ nucleotides ត្រូវបានបន្ថែមក្នុងទិសដៅ 3′ ទៅ 5′ រហូតដល់បំណែក DNA ដែលចង់បានត្រូវបានសំយោគ។ .នេះខុសពីការសំយោគ DNA ដោយការអនុវត្ត DNA polymerase ។
ចុង 3′ នៃមូលដ្ឋានទីមួយត្រូវបាន immobilized នៅលើ CPG កំឡុងពេលសំយោគ 5′-OH នៃមូលដ្ឋានបន្ទាប់ត្រូវបានការពារដោយ di-p-tolyl trityl DMT ក្រុមអាមីណូនៅលើមូលដ្ឋានត្រូវបានការពារដោយអាស៊ីត benzoic និង 3′ -OH បន្ទាប់មកត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មជាមួយនឹងសមាសធាតុអាមីណូផូស្វាត។មូលដ្ឋាន 1 នៃ 5 5′-OH នៃ 1 មូលដ្ឋាន និង 3′-OH នៃមូលដ្ឋានបន្ទាប់បង្កើតបានជា phosphite triglyceride ដែលបន្ទាប់មកត្រូវបានកត់សុីជាមួយ iodine ទៅជា phosphate triglyceride ដែលជាការការពារនៅលើមូលដ្ឋានទីពីរ 5′-OH ត្រូវបានយកចេញដោយ ការបន្ថែមអាស៊ីត dichloroacetic DM វដ្តតាមរយៈការបន្ថែមនៃមូលដ្ឋានបន្ទាប់ ហើយបន្ទាប់ពីការសំយោគសារធាតុការពារនៅលើ 5′-OH ត្រូវបានយកចេញដោយអាស៊ីតខ្សោយ បំណែកត្រូវបានផ្តាច់ចេញពីជ័ររឹងជាមួយ ammonium hydroxide ប្រមូលផ្តុំ សារធាតុការពារត្រូវបានយកចេញពីមូលដ្ឋាន។ ជាមួយនឹងការប្រមូលផ្តុំអាម៉ូញ៉ូមអ៊ីដ្រូអុកស៊ីតក្រោមកំដៅ អាម៉ូញ៉ូមអ៊ីដ្រូសែនត្រូវបានយកចេញ បំណែកត្រូវបានស្ងួតដោយខ្វះចន្លោះ ហើយអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកត្រូវបានបន្សុតដោយក្រូម៉ាតរាវ ឬ PAGE ។
ជំហាននៃការសំយោគ Oligo
ការទប់ស្កាត់
នេះ។ក្រុមការពារ DMT ចុង 5 ត្រូវបានដកចេញដោយបន្ថែមដំណោះស្រាយ TCA ។
ការធ្វើឱ្យសកម្ម
លាយសារធាតុសកម្មជាមួយម៉ូណូម័រ oligonucleotide ដើម្បីបង្កើតជាសារធាតុសកម្ម oligonucleotide monomer កម្រិតមធ្យម។
ការភ្ជាប់គ្នា។
ក្រុមអ៊ីដ្រូស៊ីល 5 ស្ថានីយមានប្រតិកម្មជាមួយនឹងកម្រិតមធ្យម oligonucleotide សកម្មនៅក្នុងប្រតិកម្មប្រឆាំងនឹងការបង្កើត condensation ដើម្បីបង្កើតជាចំណង phosphite triglyceride មិនស្ថិតស្ថេរ។
ការបិទបាំង
ការបន្ថែមភ្នាក់ងារ capping អនុវត្តប្រតិកម្ម capping acetylation ជាមួយនឹងក្រុម hydroxyl លើសដែលមិនពាក់ព័ន្ធនឹងប្រតិកម្ម condensation ។
អុកស៊ីតកម្ម
ការបន្ថែមសូលុយស្យុងអ៊ីយ៉ូតដែលមានទឹកមានប្រតិកម្មជាមួយនឹងចំណងផូស្វ័រមិនស្ថិតស្ថេរដោយការកត់សុីដើម្បីបង្កើតជាចំណងអាស៊ីត phosphoric triglyceride ដែលមានស្ថេរភាព។
ការបំបែក Cyanoethyl
ផលិតផលអាស៊ីត nucleic បន្ទាប់ពីការសំយោគជាមួយនឹងការបន្ថែមនៃដំណោះស្រាយ DEA ដើម្បីយកក្រុម cyanoethyl ចេញពីចំណង phosphate triglyceride ។
សម្អាត និងការពារ
បំណែកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកត្រូវបានកាត់ចេញពីក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូនដំណាក់កាលរឹងដោយបន្ថែមដំណោះស្រាយអាម៉ូញ៉ូមអ៊ីដ្រូសែនដែលប្រមូលផ្តុំហើយបន្ទាប់មកកំដៅដើម្បីយកក្រុមការពារចេញពីចំណងអ៊ីដ្រូសែននៃមូលដ្ឋាន។
ពេលវេលាផ្សាយ៖ ២១-វិច្ឆិកា-២០២២